Директно откриване на имунофлуоресценция

Доказателствата за тъканните структури, антитела и патогени чрез имунно етикетиране са популярни, модерни и точни. Имунофлуоресценцията се отнася до имунното маркиране с подготвени флуоресцентни антитела, които са направени да светят под ултравиолетова светлина.

В Директно откриване на имунофлуоресценция субстратът се изследва директно със светещи антитела, без първични антитела или изкуствени антигени.

Какво е директно откриване на имунофлуоресценция?

Директното откриване на имунофлуоресценция е диагностичен метод, основан на знания за имунологията, имунооцветяването и имунохистохимията. Фокусът тук е върху способността на антителата да се свързват с конкретни точки в тъканта или с антигени в серума. Тези места са епитопи.

В биохимичната диагностика има изкуствени антитела или миметици (единствено: миметични), които позволяват тези антитяло-антигенни връзки да бъдат белязани чрез флуоресценция или радиоактивност. Конюгатите с изкуствени антитела се свързват от една страна с епитопите, а от друга страна имат флуоресцентен маркер в случай на имунофлуоресценция. Това е алтернатива на използването на радиоактивни маркери. Особеното при имунофлуоресцентното директно откриване в сравнение с индиректното откриване е, че антитялото, което се свързва с епитопа на антигена в изследвания материал, също представлява конюгата на антитялото с флуоресцентния маркер. Не са необходими допълнителни антитела за директно откриване.

Флуоресцеинът, който свети под ултравиолетова светлина, и флуоресцеиновият изотиоцианат (FITC) се използват като багрила за получаване на конюгатите на изкуствените антитела в имунофлуоресценция. Засега се чете малко сложно, но директното откриване на имунофлуоресценция е стандартен метод за медицинска лабораторна диагностика за голямо разнообразие от медицински въпроси. Антителата с флуоресцентна боя са готови за продажба.

Функция, ефект и цели

Налице е директно откриване на имунофлуоресценция за тъканни изследвания за оцветяване на определени структури в тъканта. Но те са налични и за единични клетки. Проточната цитометрия играе основна роля тук. И накрая, има имунологичните твърди и течни фази. Имунофлуоресцентните изследвания на тъканите са особено важни при онкологията, т.е. медицинското лечение на раковите заболявания.

Тумор-специфични антигени в туморната тъкан могат да бъдат открити директно с имунофлуоресценция. Тези изследвания на тъканни проби от тумори често са важни, за да се разбере откъде идват съществуващите метастази в организма или за да се направи преценка дали туморът е доброкачествен или злокачествен. Изследването на отделни клетки с директно откриване на имунофлуоресценция се използва за намиране на вирусни антигени, бактериални антигени и други епитопи.

Например, можете да разберете дали клетките са заразени от вирус и в какъв етап от цикъла на инфекция клетките се намират. Наименованието FACS (= Флуоресцентно активирано клетъчно сортиране) е високоефективен метод на поточна цитометрия, при който клетките, маркирани с флуоресценция, се разпределят в различни епруветки в зависимост от вида на цвета. Тази процедура е важна при имунологията, хематологията и инфекциозните заболявания.

Имунофлуоресцентните имуноанализи позволяват директно откриване на токсини от околната среда, генетично модифицирани организми и някои добавки в храната. В тази експериментална настройка винаги има твърда и течна фаза. Множество патогени, включително ХИВ вируса, който причинява СПИН, също могат да бъдат открити директно. При откриване на инфекциозни и автоимунни заболявания обаче често става въпрос за откриване на антитела, а не на антигени. Това са защитните молекули, образувани от имунната система на организма. Според дефиницията, представена тук, такива доказателства впоследствие не са директни доказателства, тъй като флуоресцентните антитела не се свързват директно със собствените антигени на организма, а с антигените на тестовата система.

Тези антигени в експерименталната група от своя страна са свързани със собствените антитела на организма. Директното откриване на имунофлуоресценция за често срещани инфекции, например ХИВ вируси и хламидии, се използва само в специални тестове за откриване и потвърждение. Има тестове за още много заболявания. В повечето ситуации индиректното откриване на антитела е по-подходящо при инфекциозни заболявания, тъй като собствената имунна система на организма има гениална способност да запомня предишни инфекции. В други ситуации директното откриване на антигени и индиректното откриване на антитела се допълват взаимно. Последните показват, че досега е възникнала инфекция, докато първата предоставя по-точна информация за текущото състояние на активността на патогена.

Можете да намерите лекарствата си тук

Рискове, странични ефекти и опасности

При директно откриване на имунофлуоресценция, както при всички медицински доказателства, има два риска: риск от фалшив, положителен резултат и риск от фалшив, отрицателен резултат. Грешни, положителни резултати причиняват психологически дискомфорт и голям стрес за пациента.

Следователно, за положителни резултати се добавят допълнителни тестови процедури, особено ако диагнозата води до драстични промени в живота. Рискът от фалшив, отрицателен резултат е, че пациентът не научава своевременно за заплахата за собственото си здраве и може би дори за общественото здраве. Ето защо е добре да се направят много изследвания и да се направят и предложат голям брой различни имунофлуоресцентни открития, готови за продажба. Заедно с други методи за директно и косвено откриване на заболявания и патологии, това увеличава точността на диагнозата.

Директното откриване се основава на конюгата на антителата, който от една страна се свързва с епитопите на антигените, а от друга страна също предизвиква флуоресценция. Следователно такъв продукт се използва само в един вид изпитвателна процедура и не се използва за други видове изпитвателни процедури.Това е важна процедурна разлика от косвените доказателства, при които флуоресцентните антитела са предшествани от първични антитела за свързване на епитопи. Следователно конюгатът на антителата е подходящ за различни тестове. Тази процедурна разлика е различна от медицинската разлика между индиректното откриване на антитела и директното откриване на антигени.