Имуноелектрофорезата

Най- Имуноелектрофорезата се използва за лабораторно диагностично откриване на моноклонални антитела в кръвта на пациента. Моноклоналните антитела са получени от една и съща клетка и са насочени срещу същите антигени. Поради тази причина те трябва да бъдат оценени като патологични и ако бъдат доказани, говорят за заболявания като болестта на Waldenström.

Какво е Имуноелектрофореза?

Йони имат различна подвижност. Тази различна мобилност е в основата на процедурата за електрофереза. Тези методи отделят различни вещества една от друга, използвайки електрически полета и гравитация. Добре известен метод в тази област е имуноелектрофрезата.

Това е качествен диагностичен метод, който се използва за откриване на моноклонални антитела. Антителата са имунологично активни протеинови вещества от специфична клетъчна линия. Моноклоналните антитела са базирани на едни и същи В лимфоцити и затова са насочени срещу един епитоп. Всеки естествен имунен отговор на нахлуващи антигени съответства на поликлонален отговор и следователно е насочен срещу различни епитопи. Следователно моноклонален имунен отговор дава индикации за патологични процеси в тялото.

Моноклоналните антитела свързват различни молекули с висока специфичност. Това свързване може да бъде демонстрирано с помощта на имуноелектрофореза. Процедурата е качествена процедура в лабораторната диагностика и се състои от двата вида процедура, серографска електрофореза и имунодифузия.

Функция, ефект и цели

Имуноелектрофорезата съчетава методологията на серумната електрофореза с имунодифузията. Серумът на пациента се поставя върху агарозен гел или целулозен ацетатен филм. Прилага се и контролен серум. Приложението е последвано от електрофоретично разделяне на пробите. Между разделителните линии се прилагат Antisera, IgG, IgA, IgM, оцетна киселина за нормална електрофореза и kappa и lambda.

Това създава реакция с антителата в серума на пациента, което създава линии на утаяване. В зависимост от използвания антисерум и позицията и формата на отделните линии могат да се направят изводи за имуноглобулините, съдържащи се с леки вериги капа или ламбда. В случай на ламбда лента, има свободни леки вериги, съставени от антитела. Лабораторията предоставя допълнителни доказателства чрез редките IgE и IgD, което позволява точно определяне на имуноглобулините. Метод на имунодифузионна електрофореза се провежда според Пиер Грабар и Къртис Уилямс и съответства на комбинация от агарозна гел електрофореза на протеини и дифузия на антитела.

Първо се провежда електрофорезата на агарозния гел. Впоследствие съдържащите се антитела дифундират срещу лентите на антигените и по този начин създават дъги на утайката. Трябва да се прави разлика между тази и ракетна имуноелектрофореза на Лоръл, която съответства на електрофорезата на протеини в агарозен гел, всеки от които има антитела в определена концентрация. В гела има леко основен буфер, който позволява само да се мигрират антигените и който принуждава повечето антитела към изоелектричната точка чрез излагане на леко основната стойност на рН, докато не спрат да се движат електрофоретично.

В началото на ракетна имуноелектрофореза има излишък от антиген, така че се образуват разтворими комплекси антиген-антитела. По време на електрофорезата има и свързване между антигени и други антитела. По този начин имунопреципитатите се образуват в точката на еквивалентност, които приличат на ракетноподобни фигури с височина, пропорционална на концентрацията на антиген. За оценяване на теста се измерва височината на утайката.

Можете да намерите лекарствата си тук

Рискове, странични ефекти и опасности

Откриването на моноклонални антитела е от особено значение за диагностицирането на множествен миелом и болест на Waldenström. Предоставените доказателства говорят за злокачествена дегенерация на имунните клетки. Множественият миелом съответства на рак в костния мозък, който се характеризира със злокачествено размножаване на клетки, произвеждащи антитела в плазмата.

Тези плазмени клетки произвеждат антитела и техните фрагменти. Злокачествените плазмени клетки винаги идват от обща клетка-предшественик и затова са генетично идентични. Те произвеждат само моноклонални антитела. Злокачествеността на това заболяване може да съответства на предраков стадий, но може да достигне и до силно злокачествен стадий, който без лечение бързо е фатален. Симптомите на заболяването са резултат от злокачествения растеж на клетките или от антителата и фрагментите на антителата. Най-честите симптоми включват болка в костите, разтваряне на костите и спонтанни фрактури.

Нивото на калций в кръвта често се повишава. В допълнение, анормалните антитела често се отлагат в тъканта и причиняват функционални нарушения в органите, което може да доведе до симптоми като бъбречна недостатъчност или нарушен кръвоток. Болестта на Waldström също е злокачествено туморно заболяване. По-точно, това е злокачествено заболяване на лимфома, което се брои сред бавно прогресиращите и почти безсимптомни В-клетъчни неходжкинови лимфоми. В повечето случаи при заболяването може да се открие необичайно производство на моноклонални IgM, дължащо се на активността на злокачествените лимфомни клетки.

Болестта на Waldenström е изключително подобна на множествения миелом по свойствата си, но обикновено показва по-благоприятен ход. Повечето пациенти с болестта на Waldenström са до голяма степен безсимптомни по времето, когато са диагностицирани. Други пациенти показват ранни симптоми като неспецифична умора или периферни невропатии, които са причинени от отлагането на моноклонален IgM в миелиновата обвивка. Дори и малки количества от IgM могат да предизвикат полиневропатия. Полиневропатия не се наблюдава при други пациенти, дори при високи нива. Освен това могат да се появят неспецифични симптоми като треска, нежелана загуба на тегло или нощно изпотяване. Болката в костите също е характерна.

Поради свръхпроизводството на IgM, кръвта става хипервискозна, така че споменатите симптоми могат да бъдат свързани с тези на синдром на хипервискозност. В повечето случаи тази склонност към кървене се проявява в чести кръвотечения от носа, главоболие, общо неразположение или замъглено зрение и акустични оплаквания. За да се открият злокачествени заболявания от този тип, имуноелектрофрезата отдавна се е превърнала в стандартна диагностична процедура.